PC-12細胞從可移植性大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤中建立,是一株對神經生長因子(NGF)具有可逆響應的單克隆細胞系。具有均一的近二倍體染色體數目(40條)。經NGF處理一周后,PC12細胞停止增殖并開始延伸出分支狀曲張突起,其形態與原代培養的交感神經元類似。NGF誘導持續數周后,PC12細胞的突起可生長至500-1000微米。撤除NGF后24小時內突起發生退行性變,72小時內細胞恢復增殖。無論是否經NGF處理,PC12細胞內均存在直徑達350納米的致密核嗜鉻樣顆粒。經NGF處理的細胞還含有聚集在突起曲張部位和末梢的小囊泡。PC12細胞能夠合成并儲存兒茶酚胺類神經遞質多巴胺和去甲腎上腺素,其單位蛋白質含量的兒茶酚胺及其合成酶水平與大鼠腎上腺組織相當或更高。以單個細胞為基準計算時,NGF處理并未改變PC12細胞的兒茶酚胺及其合成酶水平;但以單位蛋白質含量為基準計算時,NGF處理導致該水平下降4-6倍。PC12細胞不合成腎上腺素,且地塞米松處理亦不能誘導其合成。PC12細胞系可作為神經生物學和神經化學研究的重要模型系統。
是否進行STR鑒定:
是
培養基:
85% RPMI 1640 + 10%馬血清+5%FBS
(推薦使用熱滅活的馬血清培養該細胞)
細胞接種密度:
1.2 - 2.4 x 10^5 cells/mL
細胞貼附特性說明
● JCRB細胞庫保存的PC-12細胞被標注為具有貼附性變異特征,但其實際貼附能力較弱。PC12細胞系最初建系時是懸浮細胞,JCRB細胞庫保存的PC-12細胞也常出現不貼附、聚集成團增殖的情況。
●經JCRB細胞庫測試發現,不同批次的馬血清會顯著影響JCRB0733株系的貼附性能。即使能夠貼附,細胞復蘇后通常需要數日時間才能完成貼壁。若細胞未貼壁而形成懸浮細胞團塊(該團塊由活細胞構成),可通過以下方法改善貼附性:
●更換為含10-15%胎牛血清(不含馬血清)的RPMI1640培養基進行培養。
●使用明膠包被或膠原包被的培養器皿可顯著提升貼附穩定性,此法無需更換血清類型。
●需特別注意的是:進行神經突起形態學觀察時,膠原等基質包被是必需條件。未經包被處理的培養表面可能導致:(1)神經突起幾乎無法延伸;(2)即使形成突起也易發生細胞脫壁。
在為PC-12細胞配制完全生長培養基時,需對馬血清進行熱滅活處理嗎?
● 根據保藏機構的建議,采用熱滅活馬血清聯合未做熱滅活處理的胎牛血清的配制方案,可維持該細胞的前神經元表型。
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參考文獻
Establishment of a noradrenergic clonal line of rat adrenal pheochromocytoma cells which respond to nerve growth factor. Greene LA,Tischler AS Proc Natl Acad Sci U S A. 1976 Jul;73(7):2424-8